Neste processo é necessária a presença de carbamil-P, que é também um intermediário no ciclo da uréia. Entretanto, o carbamil-P requerido na síntese da uréia, nos animais, é sintetizado por uma enzima mitocondrial, a carbamil-P sintase I, enquanto aquele necessário na biossíntese do anel pirimídico é sintetizado no citosol, por uma diferente enzima, a carbamil fosfato sintase II.